结果与讨论
相邻的枯草杆菌细胞可以互相交换细胞质中的物质
显微镜首先使用染色体中带有绿色萤光基因 (gfp)的枯草杆菌细胞 SB444,与缺
乏 gfp 的 PY79 共同培养在固体培养基上,之后使用萤光显微镜观察。结果发
现从 gfp+细胞所在的位置到 gfp-细胞,绿色萤光呈现梯度下降,涵盖的范围约
有 40 M (图 1Ab,1B);当将绿色萤光与 phase contrast 影像重迭后,发现绿色
萤光梯度只存在于有细胞的位置 (图 1Ac)。接着显微镜使用 time-lapse
microscopy 观察单一细胞层次,在 T0 分钟时只有 gfp+细胞所在位置有侦测到
绿色萤光 (图 1Ca);30 分钟过后,gfp+细胞附近的 gfp-细胞也开始出现微弱的
萤光讯号 (图 1Cb);并且,萤光强度与距离 gfp+细胞的远近呈现函数关係 (图
1D)。接着,显微镜使用 Calcein 进行测试。Calcein 为十分亲油性物质,能够轻
易穿越细胞膜 但一旦进入细胞后就会被细胞质中的 esterases 水解成亲水性物
;
质,而被侷限在细胞质中。显微镜首先将 PY79 与 calcein-AM 一同培养,之后再
与未标定的细胞溷合。于 t0 分钟时只有被标定的细胞可侦测到萤光强度 (图
2A,2A’);但随着时间增长,原先未被标定的细胞也开始出现萤光讯号 (图
2B,2C);而在 t30 分钟时几乎所有未被标定的细胞都可侦测到萤光讯号,但一
开始被标定的细胞其萤光讯号有减弱的现象 (图 2C,2C’)。