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在水质污染菌的调查研究中,需要确定污染细菌的种类或类型时,仅仅
用生理生化方法鉴定还不够,特别是对肠杆菌科的一些细菌的检验有必
要借助免疫学反应进一步作种间与种内的鉴别。
这是由于此种免疫血清中含有结合性的物质y-球蛋白,称为抗体,与
此相对应的异构物则称为抗原。用于微生物鉴定的抗原物质是位于微
生物体表,如鞭毛、荚膜、细胞壁的多糖类等。鞭毛抗原称为H抗原,荚
膜抗原称为K抗原,细胞壁抗原为O抗原抗原和抗体的结合具有严格的特
异性,则可用已知抗体检?未知抗原,常用已知的免疫血清来鉴定未知的
污染水中的病原菌。此类反应是在体外进行。如在试管中,通常由于抗
原的物理状态不同(颗粒性或可浴性)和参加反应的辅助因素不同(如补
体、电解质),以及操作方法的不同,常可
沉淀反应的试验
此反应与凝集反应相似,都是抗原微粒在电解质的环境中,由于与
抗体的作用而集结,不同的是抗原的大小不致。在凝集反应中,抗原微
粒是显微镜下可见的细菌细胞而沉淀反应中的抗原微粒呈胶体状态,其
大小接近分子水平。沉淀反应比凝集反应的灵敏度高,特异性更强,故
有些鉴定工作用沉淀反应更合适。鉴定方法如下
①用生理盐水将待测菌制成浓菌液,立即加0,5%苯酚防腐.放入冰箱
内保存6星期,每天摇动1―2次。
②取保存的菌液离心,去沉淀物,得清净透明的细菌蛋白质提取液
⑧将0,1毫升完全澄清的抗血清(或其适当的稀释液)加到6×25毫米
的小试管中
④取待测菌的蛋白质提取液(即抗原)0.1毫升,小心地注入管内,使其
在抗血清上面成为另一液层。如果在5一15分钟内于两液界面上形成一
个白色沉淀环,则为阳性反应。所以此种反应也称环状沉淀反应在此试
验法中的血清使用量不变,而抗原则必须稀释,
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