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细胞毒理实验实验报告
1.实验原理
a.观察细胞培养在有害物质下,分别观察三十分钟(短期毒理) ,和二十四小时(长期毒理)的细胞生长和死亡状况。
b.藉由观察细胞生长情况,推算出在不同浓度下的死亡率。
c.本次实验使用malachite green做为毒性物质,一般而言malachite green对生物体是有害的。
d.先求得malachite green对HeLa细胞在三十分钟培养下的LD50值,再取此值的百分之五十的浓度做为长期毒理实验浓度。
2.实验方法
a.配制不同浓度的malachite green,加入细胞培养皿中,培养三十分钟后,计算细胞死亡率,求得LD50值。
b.取三十分钟的LD50值浓度的百分之五十做为长期毒理实验浓度,加入细胞培养皿中,观察二十四小时后的存活率,并找出让HeLa全死所需最低浓度,以及HeLa完全不死所能忍受的最高
浓度。
3.结果
a.malachite green对HeLa细胞的三十分钟短期毒性LD50值约为1*10-4M,见Table.1
b.使用5*10-5M的malachite green做为二十四小时长期毒性实验,细胞死亡率为33.7%,见Table. 2
c.使用不同浓度的malachite green测试HeLa全死所需最低浓度,以及HeLa完全不死所能忍受的最高浓度:
(i) HeLa全死所需最低浓度: 1.5*10-4M
(ii) HeLa完全不死所能忍受的最高浓度: 1*10-7M
4.讨论
a.从实验结果看来malachite green对HeLa毒性并不高。
b.当加入低浓度malachite green,如1*10-7M,培养二十四小时后发现malachite green的绿色转为无色,推测细胞有办法抵御低浓度的malachite green,避免细胞受到伤害。
c.由Table可以看到细胞死亡率和malachite green浓度并没有呈倍数关系,表示毒物必须累积到一定的浓度才会对细胞造成伤害。
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