在电生理实验的部份,我们要纪录螯虾(crayfish)逃跑神经(Lateral Giant(LG)) 的静止电位及兴奋性突触后极化电位(excitatory postsynaptic potentiation (EPSP). 为了要有状况良好的神经及完整的LG迴路,我们先练习如何避免在解剖的过程中伤害到突触间的连结.熟练后儘量缩短解剖的时间,避免灯光的照射产热使神经的活性降低及膜的表面发生变化,不利玻璃电极的穿刺.
原理:
细胞会因为内外离子浓度不等加上各种离子通道的作用,造成细胞膜内外有微量的电位差,可以想像有一层正电离子或负电离子的薄膜分布在细胞的内外表面。在无刺激的情形下,神经元细胞的静止电位(resting potential)约为-70mV。一但受到够强烈的刺激,神经细胞可以藉由动作电位(action potential)的产生长途传递膜电位的变化。当两个神经元藉由突触(synapse)相接,讯息便可以由前一个神经元传给下一个神经元。在解剖得到的螯虾逃跑神经迴路中我们可以清楚的看到primary afferent及LG。若将内含3MKCl电阻值为0-15MΩ的玻璃电极插入LG轴突的起始体节内,将成对的银线电极置于N234(primary afferent nerves)处,施加适当强度的电刺激,就可以记录到EPSPs﹔由于刺激传递所经的途径不同造成反应产生的时间差,我们可以观察到α和β两种 EPSPs。若将刺激电极置于第五及第四神经节之间给予适度的刺激,可纪录到LG与MG的主动电位(action potential)。
解剖剪刀 / 镊子 / 解剖盘 / 固定针 / Head Stage / 电极(Electrode) / 放大器(Amplifier/Filter)) / 讯号产生器(Stimulator) / 类比/数位转换器(Analog/digital Converter) / 示波器(Oscilloscope) / 电脑(Computer) / 解剖显微镜 / 三向微细操作仪