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本文标题:"显微镜下人工的方法培养细胞以进行病毒的接种"

新闻来源:未知 发布时间:2011-11-8 9:51:56 本站主页地址:http://www.jiance17.com

显微镜下人工的方法培养细胞以进行病毒的接种

一、目的
显微镜下人工的方法培养细胞以进行病毒的接种
以人工的方法培养细胞以进行病毒的接种或增殖之用

二、原理

病毒不若细菌可以在人造之培养基上增殖,必须依赖活体细胞来製造病毒所

需之蛋白质、酵素等,因此为达到增殖病毒之目的,必须先培养细胞,而人工培

养细胞又可分成初代细胞培养以及株化细胞之继代培养,前者所取之材料为动物

内脏、组织或胚胎,后者则为已癌化之细胞株,依病毒增殖之喜好选择初代细胞

或株化细胞培养。

三、材料与设备

(一) 材料

1. 培养基(minimum essential medium; MEM)

2. 胎牛血清 (fetal calf serum; FCS)

3. 磷酸缓冲溶液(PBS; pH 7.2-7.4)

4. Vero 细胞株

5. 25 cm2 细胞培养瓶 (culture flask)

6. Dulbecco's PBS

7. citosol 麻醉剂

 8. RPMI-1640 细胞培养液

9. penicillin 及 streptomycin

10. Trypan blue 染剂

11. 24 孔平板培养皿

(二) 设备

1. 无菌操作台

2. 倒立显微镜

3. 微量吸管(pipetman)

4. 塑胶吸管(1、5、10、20 ml)

5. 血球计算板

6. 真空帮浦

7. 二氧化碳培养箱

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