一、实验动机:
工业技术日新月异,化举药品使用量随之逐日升高。因为种种不慎,化学中毒的现象有增无减。铅是毒性甚高的重金属,也是工业界常用的。故本实验选择铅为代表,研究其对鸡胚发育的具体影响,进而推展到人体的反应。在生物研究上已成长中的鸡胚是最早而直到目前仍被广泛利用的活系统,受精卵的易得,胚胎的迅速生长及容易改变它的环境。凡此种种使得鸡胚成为一个模范系统,可作形态上、生化上及功能上的种种研究。
二、实验目的:
借着发育中之鸡胚研究药物Na2—EDTA对于Pb(CH3COO)2引发之中毒是否具有解毒功能。
三、实验材料:
Pb(CH2COO)2—0.02 mg/0.1 ㏄ 0.04 mg/0.1 ㏄
0.06 mg/0.1 ㏄
Na2―EDTA―0.023 mg/0.1 ㏄ 0.046 mg/0.1 ㏄
0.069 mg/0.1㏄
CrO3 蒸馏水 70%酒精 种蛋
孵卵器 23号针头 1 cc 针筒 高压蒸汽消毒器
滤纸 尖头剪刀 镊子 滴管 培养皿 酒精灯 温度计 解剖显微镜
放大镜 加温装置 0.9%之生理食盐水
四、实验方法
(一)选择粤东鸡场同日所产之来亨鸡种蛋。
孵卵期内孵卵器保持38。C及65%~85%之一定湿度。1、Na2―EDTA,间隔时间分别为接着打,隔3小时及隔6小时Pb(CH3COO)2之浓度为0.02 mg/0.1㏄,Na2―EDTA之浓度为0.046 mg/0.1㏄及0.069 mg/0.1㏄
2、第3组又分3小组,为注射0.06 mg/0.1㏄之Pb(CH3COO)2后,紧接着注射不同浓度之Na2―EDTA其浓度分别为0.023 mg/0.1㏄,0.046 mg/0.1㏄及0.069 mg/0.1㏄。
(一)选择牺牲日期――胚胎送入孵卵器满19天后牺牲。
(二)观察发育后期之鸡胚︰
以剪刀柄轻轻敲裂鸡蛋钝端,小心取去卵壳,注意不要伤到卵膜,放入38℃之生理食盐水中,继续剥卵壳,小心剪开卵膜及胎膜,避免伤及胚胎。培养皿内之生理食盐水若混浊,可用滴管小心再换上温暖之生理食盐水,然后将整个培养皿放在解剖显微镜之载物台上,用低倍镜观察。观察项目为脑、脚、翼、喙及一般形态。
(三)量CR长度及称重。